賽默飛Varioskan LUX酶標(biāo)儀簡(jiǎn)介與使用說(shuō)明

一、儀器概述

Varioskan LUX是賽默飛公司推出的一款多功能光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)，屬于多模式酶標(biāo)儀。它支持多種檢測(cè)模式，包括吸光度（Absorbance）、熒光強(qiáng)度（Fluorescence Intensity）、時(shí)間分辨熒光（Time-Resolved Fluorescence, TRF）、發(fā)光（Luminescence）、熒光偏振（Fluorescence Polarization, FP）以及AlphaScreen/AlphaLISA等技術(shù)。適用于生物化學(xué)、細(xì)胞學(xué)、分子生物學(xué)等研究領(lǐng)域的數(shù)據(jù)采集和分析。

Varioskan LUX采用模塊化光學(xué)系統(tǒng)，結(jié)合自動(dòng)化功能、觸控操作界面和軟件平臺(tái)SkanIt，滿足科研與高通量檢測(cè)需求。其設(shè)計(jì)強(qiáng)調(diào)用戶體驗(yàn)簡(jiǎn)化與操作靈活性，適配多種微孔板格式（96孔、384孔、1536孔）以及單管檢測(cè)。

二、基本原理

Varioskan LUX的工作基于光學(xué)檢測(cè)原理。不同檢測(cè)模式對(duì)應(yīng)不同的光源、探測(cè)器與光路設(shè)置：

1. 吸光度測(cè)量：通過(guò)測(cè)量樣品對(duì)入射光的吸收程度，反映樣品中物質(zhì)濃度。使用氙燈為光源，結(jié)合可變波長(zhǎng)單色器進(jìn)行波長(zhǎng)掃描。

2. 熒光檢測(cè)：熒光探針在激發(fā)光作用下發(fā)出特定波長(zhǎng)的發(fā)射光，儀器通過(guò)濾光或單色器檢測(cè)其強(qiáng)度。適合用于蛋白標(biāo)記、核酸檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)。

3. 時(shí)間分辨熒光（TRF）：利用發(fā)光延遲特性，提高信噪比，常用于稀有元素標(biāo)記（如銪）的免疫分析。

4. 發(fā)光檢測(cè)：無(wú)需激發(fā)光源，直接檢測(cè)化學(xué)反應(yīng)或生物發(fā)光產(chǎn)生的光信號(hào)，常用于酶促反應(yīng)或細(xì)胞活性分析。

5. AlphaScreen技術(shù)：基于供體和受體微珠間的能量傳遞，實(shí)現(xiàn)無(wú)洗滌的高靈敏度檢測(cè)。

三、儀器組成

Varioskan LUX主要由以下部分構(gòu)成：

1. 檢測(cè)光學(xué)系統(tǒng)：包含氙燈、LED光源、單色器、濾光片、探測(cè)器等，用于實(shí)現(xiàn)多模式檢測(cè)。

2. 微孔板模塊：自動(dòng)托盤系統(tǒng)支持多種孔板格式，并可進(jìn)行控溫（室溫至+65°C）與震蕩功能。

3. 自動(dòng)化接口：支持機(jī)械臂對(duì)接，實(shí)現(xiàn)自動(dòng)進(jìn)板和連續(xù)檢測(cè)。

4. 控制界面：配有內(nèi)置觸控屏，可本地設(shè)置參數(shù)或通過(guò)SkanIt軟件在計(jì)算機(jī)端控制。

5. 數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)：SkanIt軟件支持實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、數(shù)據(jù)采集、計(jì)算、標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合及報(bào)告輸出。

四、操作流程

1. 儀器準(zhǔn)備

• 開機(jī)與自檢：連接電源與計(jì)算機(jī)，開啟主機(jī)，儀器自動(dòng)進(jìn)行系統(tǒng)自檢，檢查光源、機(jī)械托盤與溫控系統(tǒng)狀態(tài)。

• 軟件初始化：?jiǎn)?dòng)SkanIt軟件，確認(rèn)儀器已連接，并進(jìn)入實(shí)驗(yàn)設(shè)置界面。

2. 實(shí)驗(yàn)設(shè)置

用戶需在軟件中進(jìn)行以下設(shè)定：

• 板型選擇：選擇使用的孔板格式（如96孔、384孔）。

• 檢測(cè)模式選擇：根據(jù)實(shí)驗(yàn)類型設(shè)定吸光度、熒光、發(fā)光等檢測(cè)方式。

• 波長(zhǎng)選擇：輸入所需激發(fā)波長(zhǎng)與發(fā)射波長(zhǎng)（對(duì)于熒光模式），或測(cè)量波長(zhǎng)（對(duì)于吸光度）。

• 讀取參數(shù)設(shè)置：如讀取高度、讀取次數(shù)、讀取順序等。

• 溫控設(shè)置（如需要）：設(shè)定孵育溫度及持續(xù)時(shí)間。

• 震蕩模式：選擇線性、軌跡式或雙向震蕩，并設(shè)定持續(xù)時(shí)間與速度。

3. 樣品準(zhǔn)備與裝載

• 將樣品加至孔板中，避免邊緣效應(yīng)與氣泡影響。

• 將孔板正確放入托盤，確保方向一致（A1孔朝左上）。

• 在軟件中點(diǎn)擊“讀取"，儀器自動(dòng)啟動(dòng)檢測(cè)。

4. 數(shù)據(jù)采集與分析

• 檢測(cè)過(guò)程中，實(shí)時(shí)顯示原始數(shù)值或信號(hào)曲線。

• 軟件可進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線構(gòu)建、濃度計(jì)算、數(shù)據(jù)校正與歸一化處理。

• 支持多組重復(fù)實(shí)驗(yàn)、平均值計(jì)算與標(biāo)準(zhǔn)差統(tǒng)計(jì)。

• 數(shù)據(jù)可導(dǎo)出為CSV、Excel、PDF等格式，并可自定義報(bào)告模板。

五、主要功能與技術(shù)參數(shù)

六、應(yīng)用領(lǐng)域

Varioskan LUX廣泛應(yīng)用于多個(gè)研究方向：

1. 細(xì)胞生物學(xué)：細(xì)胞活力檢測(cè)、凋亡分析、熒光標(biāo)記蛋白研究。

2. 免疫檢測(cè)：ELISA、AlphaLISA、高靈敏抗體篩選。

3. 基因分析：熒光定量PCR前期反應(yīng)驗(yàn)證、核酸雜交實(shí)驗(yàn)。

4. 藥物篩選：高通量篩選化合物對(duì)酶或受體的作用。

5. 環(huán)境檢測(cè)：污染物光學(xué)信號(hào)檢測(cè)、化學(xué)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究。

七、日常維護(hù)與注意事項(xiàng)

1. 日常維護(hù)

• 每日開機(jī)前檢查濾光系統(tǒng)與托盤是否干凈。

• 使用完畢后關(guān)閉光源，避免長(zhǎng)期曝光。

• 定期清潔檢測(cè)窗口與板托，避免液體殘留。

• 每季度檢查校準(zhǔn)狀態(tài)，必要時(shí)聯(lián)系廠商進(jìn)行專業(yè)校準(zhǔn)。

2. 注意事項(xiàng)

• 使用前詳細(xì)閱讀使用手冊(cè)，熟悉各項(xiàng)安全規(guī)定。

• 在使用高敏模式時(shí)，盡量避免環(huán)境光干擾。

• 樣品體積需滿足檢測(cè)要求，避免低液面干擾。

• 切勿在運(yùn)行中強(qiáng)行取出板托，避免損傷機(jī)械系統(tǒng)。

八、故障排查簡(jiǎn)表

九、總結(jié)

Varioskan LUX酶標(biāo)儀作為一款多模式光學(xué)檢測(cè)平臺(tái)，適配多種科研與應(yīng)用場(chǎng)景。其檢測(cè)模式全面，操作界面友好，數(shù)據(jù)處理功能豐富，適合從基礎(chǔ)研究到高通量篩選的多種實(shí)驗(yàn)需求。正確掌握儀器功能、規(guī)范操作流程、按時(shí)進(jìn)行維護(hù)，有助于確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性與實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性。

如需更高級(jí)的使用技巧，如腳本自動(dòng)控制、結(jié)果批處理、復(fù)雜曲線擬合等，建議參考SkanIt高級(jí)手冊(cè)或參加相關(guān)技術(shù)培訓(xùn)，以充分發(fā)揮該系統(tǒng)的性能。